[发明专利]一种ZmMIR398b-pro的应用在审

专利信息
申请号: 202211559909.1 申请日: 2022-12-06
公开(公告)号: CN116004626A 公开(公告)日: 2023-04-25
发明(设计)人: 刘琳;李晶;左志芳;何文博 申请(专利权)人: 深圳大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/84;C12Q1/6895;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 深圳尚业知识产权代理事务所(普通合伙) 44503 代理人: 郑姣
地址: 518000 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明实施例公开了一种ZmMIR398b‑pro的应用,用T‑DNA插入转基因技术构建两个串联重复发卡结构的ZmmiR398过表达载体及转基因植物,用PCR方法将ZmmiR398成熟核苷酸序列克隆并构建至pOT2‑Polycis‑UN载体,进一步将ZmmiR398构建到目的载体pZZ00026‑PM,得到ZmmiR398过表达载体并转入玉米自交系C01的不成熟胚中得到多个转基因事件;通过Northern blot鉴定ZmmiR398基因在叶片中表达量升高的独立事件。用T‑DNA插入转基因技术构建了包含ZmMIR398b启动子融合GUS基因的表达载体及转基因植物。使用引物PCR扩增ZmMIR398b promoter核苷酸序列,并使用BamH I和NcoI双酶切PCR产物后,将ZmMIR398b启动子构建到目的载体pCAMBIA3301‑GUS中;将pCAMBIA3301‑ZmMIR398b promoter‑GUS过表达载体转入玉米自交系C01的不成熟胚中;通过GUS组织化学染色的方法鉴定ZmMIR398b promoter在玉米热胁迫下的响应。
搜索关键词: 一种 zmmir398b pro 应用
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