[发明专利]一种基于CRISPR/Cas12a和指数滚环扩增检测miRNA155的方法在审

专利信息
申请号: 202211460172.8 申请日: 2022-11-17
公开(公告)号: CN115976171A 公开(公告)日: 2023-04-18
发明(设计)人: 汪显峰;马鑫;周仕英;沈宫乐;钟琳玲 申请(专利权)人: 江南大学;江苏省中以产业技术研究院
主分类号: C12Q1/6844 分类号: C12Q1/6844;C12N15/113;C12N15/11
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 林娟
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a和指数滚环扩增检测miRNA155的方法,属于医学检测领域。本发明通过引入携带有两个酶识别位点的哑铃探针为模板,操作简单,无需退火程序。对miRNA155进行指数滚环扩增(T‑ERCA),进一步的,T‑ERCA反应的扩增产物ssDNA被CRISPR/Cas12a识别,并激活其反式切割活性,切割外源单链信号探针,释放荧光信号。T‑ERCA和CRISPR/Cas12a的双重扩增效应确保了T‑ERCA/Cas12a检测体系具有较高灵敏度,检测范围从1fM到5nM,检测限为0.31fM。本发明提供的方法操作简单,不需要大型仪器,为CRISPR/Cas传感器平台在临床诊断检测提供新思路和理论基础。
搜索关键词: 一种 基于 crispr cas12a 指数 扩增 检测 mirna155 方法
【主权项】:
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