[发明专利]一种用短芽孢杆菌系统生产重组人BAG3蛋白的方法在审
| 申请号： | 202211358896.1 | 申请日： | 2022-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN116162144A | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 王霞;王佩佩;陈聪亮;胡俊梅;魏大鹏 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N15/75;C12N1/21;C07K1/22;C12R1/08 |
| 代理公司： | 成都科海专利事务有限责任公司 51202 | 代理人： | 黄幼陵 |
| 地址： | 610065 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明所述用短芽孢杆菌系统生产重组人BAG3蛋白的方法，培养人胰腺导管癌细胞提取总RNA、逆转录成cDNA后利用针对Bag3基因的引物进行PCR扩增，得到序列表中的序列1所示Bag3基因；再将Bag3基因片段与载体pNCMO2连接得到重组载体pNCMO2‑Bag3，然后将重组载体pNCMO2‑Bag3转化进E.coliTOP10中保存并扩增重组载体，随后将提取重组载体pNCMO2‑Bag3电转进B.choshinensis得到重组转化体B.choshinensis/pNCMO2‑Bag3，再将B.choshinensis/pNCMO2‑Bag3菌液在MTN培养基中扩大培养，胞外表达目的蛋白并纯化、鉴定，即得到重组人BAG3蛋白。由于本发明所述方法采用短芽孢杆菌表达系统构建重组转化体，因而得到的重组转化子阳性率高，表达过程快速高效，可实现后期大规模扩大培养并简化纯化工艺、降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 芽孢 杆菌 系统 生产 重组 bag3 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
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