[发明专利]一种极速基因合成方法在审
| 申请号： | 202210966955.7 | 申请日： | 2022-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN115873882A | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 喻明军;王维坤;骆晓文;寿文静;陈健 | 申请（专利权）人： | 通用生物（安徽）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P19/34;C12N9/12;C12N9/00;C07K19/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人： | 刘念 |
| 地址： | 239000 安徽省滁州*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种极速基因合成方法，属于生物合成技术领域，设计并合成寡核苷酸后通过重叠延伸PCR技术进行组装，再加入引物和聚合酶等进行第二轮PCR，对最终的PCR产物进行分析和纯化，得到纯化的DNA片段，将纯化后的DNA片段克隆进pUC19载体，转化大肠杆菌后挑选单克隆菌落并进行菌落PCR，抽提质粒并进行测序验证；将质粒纯化，纯化后的质粒采用基因测序技术对克隆产物进行验证，对比是否有突变、SNPs、插入或缺失，进行QC酶切验证后完成基因合成；转化克隆过程所采用的改良型大肠杆菌的质粒拷贝数增加；所采用的聚合酶具有DNA合成活性、常温和高温条件下小片段连接活性，缩短了基因合成的时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基因 合成 方法 | ||
【主权项】：
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