[发明专利]基于CRISPR/CasRx的基因编辑方法及其应用有效

专利信息
申请号: 202110919746.2 申请日: 2021-08-11
公开(公告)号: CN113604469B 公开(公告)日: 2023-01-24
发明(设计)人: 舒易来;胡晓湘;李耕林;郑子文;李果;崔冲 申请(专利权)人: 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/864;C12N15/65;C12N15/55;A61K48/00;A61P27/16
代理公司: 成都帝鹏知识产权代理事务所(普通合伙) 51265 代理人: 李华
地址: 200000*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了一种靶向Tmc1突变体(c.1235T>A;p.M412K)的sgRNA、表达载体、CRISPR‑CasRx系统、试剂盒及其应用,属于基因工程技术领域。本发明中所述的靶向Tmc1突变体的sgRNA的序列如SEQIDNO.3所示,含有该sgRNA的CasRx在不干扰野生型Tmc1+的情况下,能够使得Tmc1Bth转录物减少82%,将基于AAV‑PHP.eB载体的CasRx注入新生贝多芬小鼠内耳,发现Tmc1Bth在2周内减少了70%,整个转录组没有检测到脱靶。本发明提供的sgRNA靶向Tmc1突变体的特异性高,能够提高Tmc1Bth突变小鼠毛细胞存活率,使得纤毛束形态得以恢复,机械转导电流减少,对进行性听力损失有显著改善。
搜索关键词: 基于 crispr casrx 基因 编辑 方法 及其 应用
【主权项】:
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