[发明专利]基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法

摘要

本发明涉及一种基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法。该化学发光筛选方法的检测溶液包括一对抗原‑DNA偶联物、双链DNA探针、模板DNA、脱氧核糖核苷三磷酸、核酸连接酶及聚合酶。分配在96孔板中的杂交瘤单细胞培育1天后，取其上清液与检测溶液反应，如为特异性杂交瘤细胞，上清液中会有其分泌的特异性抗体，通过免疫识别，可同时结合检测液中的抗原‑DNA偶联物对，继而基于邻位效应，引发核酸组装及滚环扩增反应，产生大量焦磷酸根离子(PPi)。PPi能络合辣根过氧化物酶‑Cu2+复合物(HRP‑Cu2+)中的Cu2+恢复HRP的活性。通过HRP催化产生的化学发光信号对分泌的特异性抗体进行定量分析并完成对特异性杂交瘤细胞的筛选。