[发明专利]极地来源的弯孢聚壳属真菌原生质体的制备方法有效
申请号: | 202110679651.8 | 申请日: | 2021-06-18 |
公开(公告)号: | CN113337406B | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
发明(设计)人: | 卢小玲;宁耀东;胡波;于豪冰;刘小宇;孔杰;徐尧;焦炳华 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军海军军医大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 赵青 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了极地来源的弯孢聚壳属真菌原生质体的制备方法,包括(1)新鲜菌丝体制备:取活化培养了2‑3代的菌丝体或菌株种子液接种至PDB液体培养基中摇瓶培养;(2)菌丝体收集:菌丝体液离心弃上清后使用0.65~0.85mol/L的灭菌渗透压稳定剂清洗,得待用菌丝体;(3)酶解液的制备:配置裂解酶和崩溃酶混合液,加入灭菌渗透压稳定剂充分溶解、过滤除菌后冷藏待用;(4)原生质体制备:将酶解液加入到(2)收集的菌丝体中,摇床下恒温培养;(5)原生质体收集:将步骤(4)的混合液过滤,离心弃上清后使用灭菌渗透压稳定剂清洗并重悬;(6)原生质体再生:将(5)中的原生质体悬液与再生培养基混合,倒平板凝固后于28℃培养箱中培养,观察复苏情况。 | ||
搜索关键词: | 极地 来源 弯孢聚壳属 真菌 原生 质体 制备 方法 | ||
【主权项】:
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