[发明专利]一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌、制备方法及应用有效
| 申请号： | 202110639403.0 | 申请日： | 2021-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN113528409B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 彭文舫;郝怡乐 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/55;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 蓝晓玉 |
| 地址： | 430062 湖北省武汉市武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌、制备方法及应用。本申请通过比对ZM4菌株与其他同样携带内源I型CRISPR‑Cas系统的菌株，内源CRISPR相关蛋白的编码基因序列差异，找到了其Cas3蛋白的功能结构划分。并且通过探究I‑F型CRISPR‑Cas系统的工作原理，设计并替换了ZM4菌株内Cas3蛋白解旋酶结构域中的一个氨基酸。将原本ZM4菌株上编码Cas3蛋白的ZMO0681基因内的676,661号的腺嘌呤核苷酸原位替换为胞嘧啶核苷酸，使Cas3蛋白丧失解旋酶活性，转变为只携带单链DNA核酸内切酶活性的nCas3蛋白，从而得到改造后菌株DRM2。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ncas3 核酸 内切酶 工程 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
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