[发明专利]一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌、制备方法及应用有效
| 申请号： | 202110639403.0 | 申请日： | 2021-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN113528409B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 彭文舫;郝怡乐 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/55;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 蓝晓玉 |
| 地址： | 430062 湖北省武汉市武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 ncas3 核酸 内切酶 工程 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：将质粒pL2R用
S2：将单碱基编辑质粒转化到制备成感受态细胞的DRM1菌株。
2.根据权利要求1所述的一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌的制备方法，其特征在于：所述原间隔序列S(D608)由引物退火过程得到，将SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示的引物各1µL混合到反应缓冲液中，经PCR仪95℃反应5分钟后再降至室温反应10分钟得到。
3.根据权利要求1所述的一种含nCas3单链核酸内切酶的工程菌的制备方法，其特征在于：所述核苷酸替换后的
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