[发明专利]一种人源化胶原蛋白制备工艺和方法在审
申请号: | 202110252835.6 | 申请日: | 2021-03-09 |
公开(公告)号: | CN113151342A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 尹鸿萍;刘永军;乐龙;张健;贡艳;冯瑞茹;胡绍显;邵青青 | 申请(专利权)人: | 南京东万生物技术有限公司;江苏艾洛特医药研究院有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/66;C12N15/12;C07K14/78;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/36;C12R1/84 |
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地址: | 211500 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及生物工程技术领域,具体为一种人源化胶原蛋白制备工艺和方法,包括以下步骤;(1)制备质粒:优选人源蛋白中的II型和III型胶原蛋白基因螺旋区的DNA片段,利用PCR技术将DNA片段进行密码子优化和拼接重组,利用引物上加入的NcoI和Xho I的酶切位点,加入相应的限制性内切酶将基因片段切成粘性末端,并与相应酶切处理过的pET32a的表达载体共孵育,(2)转化:将步骤(1)制备的质粒与毕赤酵母进行混合进行转化,获得转化后菌落;(3)多拷贝插入重组子的筛选:将步骤(2)转化后的菌落进行进一步培养,筛选转化子;(4)发酵:将步骤(3)筛选的转化子接种后进行发酵培养获得发酵液;(5)纯化:将步骤(4)得到的发酵液依次进行固液分离、过滤、浓缩和离子交换层析得到产品。 | ||
搜索关键词: | 一种 人源化 胶原 蛋白 制备 工艺 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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