[发明专利]一种沙门菌灭活疫苗的制备方法及应用在审
申请号: | 202011479886.4 | 申请日: | 2020-12-15 |
公开(公告)号: | CN112546210A | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
发明(设计)人: | 马喆;左庚亮 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | A61K39/112 | 分类号: | A61K39/112;A61P31/04;G01N33/569;G01N33/68 |
代理公司: | 上海创开专利代理事务所(普通合伙) 31374 | 代理人: | 吴海燕 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种沙门菌基因突变株灭活疫苗的制备方法及应用,利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC。取过夜培养的ΔPagC菌液,1:100接种到50ml液体LB培养基中,37℃、180rpm振荡培养至OD值约0.8;加入终浓度为0.4%的甲醛溶液,继续振荡培养16h,4℃、5000rpm离心10min后收集菌体,用无菌的PBS缓冲液洗涤重悬3次后获得原液。调整好剂量与佐剂1:1混合,充分乳化后接种动物。本发明通过制备沙门菌灭活疫苗,疫苗株接种小鼠后无不良反应,可保护小鼠应对鸡白痢沙门菌CVCC1800、肠炎沙门菌ATCC19585和鼠伤寒沙门菌CVCC542的感染。该疫苗能够能够与基于PagC蛋白的沙门菌抗体间接ELISA检测试剂盒联用,实现沙门菌人工免疫和自然感染的鉴别诊断,表现出良好的DIVA特性。 | ||
搜索关键词: | 一种 沙门 菌灭活 疫苗 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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