[发明专利]一种精确定量检测自噬流的方法在审
| 申请号: | 202011228259.3 | 申请日: | 2020-11-06 |
| 公开(公告)号: | CN112322661A | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
| 发明(设计)人: | 张昊星;李延鹏;李嘉恒;吴精博 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
| 主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/65 |
| 代理公司: | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人: | 李鹏 |
| 地址: | 518055 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种精确定量检测自噬流的方法,步骤如下:(1)构建EGFP/LC3HIBIT共表达载体,EGFP和LC3HIBIT分别用于独立的启动子,互不影响;(2)通过瞬转或筛选单克隆的方法,获得EGFP和LC3‑HIBIT蛋白的共同表达的细胞;(3)筛选单克隆稳转细胞后,可在此细胞的基础上进行与自噬相关的各种遗传操作,及筛选自噬相关药物等;(4)在多功能酶标仪上设置程序分别测定发光和荧光读值,以EGFP为该实验中的内参,校准因细胞差异导致的HIBIT读值,从而准确反映细胞的自噬程度。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 精确 定量 检测 方法 | ||
【主权项】:
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