[发明专利]一种检测凋落物乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的方法有效
申请号: | 202010063061.8 | 申请日: | 2020-01-19 |
公开(公告)号: | CN111707645B | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 刘兵;曲朝磊;徐杰;马阳;耿莉;杨艺红;孙辉 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测凋落物乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的方法,属于酶活检测技术领域。本发明提供的方法为:将凋落物样品破碎后装到离心过滤管中,添加培养缓冲液低温培养后高速离心并混合滤液定容至一定体积,制备灭活酶液;将酶活性液和灭活酶液依次分别添加酶活性孔和阴性对照孔,再添加4‑MUB‑β‑D‑乙酰氨基葡萄糖苷工作液,在遮光条件下震荡培养;培养后,向所有酶标孔添加Tris终止液;利用多功能酶标仪进行MUB荧光检测;计算乙酰氨基葡萄糖苷酶比酶活。本发明采用离心过滤管,降低了酶液中的干扰物质;优化了反应体系,灵敏度高,酶液耗量少,反应终止后,测试液pH对上机数据没有影响,真实有效反映凋落物中酶活性。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 凋落 乙酰 氨基 葡萄 糖苷酶 活性 方法 | ||
【主权项】:
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