[发明专利]一种结合双向凝胶电泳和质谱鉴定糖蛋白糖链结构的方法

摘要

本发明公开了一种结合双向凝胶电泳和质谱鉴定糖蛋白糖链结构的方法。所述方法包括以下步骤：S1、对生物样本中的糖蛋白进行特异性富集并通过双向凝胶电泳进行分离，根据目标糖蛋白的分子量和等电点选定目标糖蛋白异构体凝胶斑点；S2、使用双向凝胶电泳蛋白印迹和质谱对选定的目标糖蛋白异构体凝胶斑点进行确认；S3、对步骤S2中确认了的目标糖蛋白异构体凝胶斑点进行胶内酶解和质谱分析，鉴定其肽段序列和糖链结构。本发明适用于各种蛋白翻译后修饰(糖基化，泛素化和乙酰化等)生物标志物异构体和修饰体的分离以及结构鉴定，可以显著提高翻译后修饰蛋白作为诊断标志物的灵敏度和特异性。