[发明专利]阪崎克罗诺杆菌核酸快速恒温检测方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201911167632.6 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN110760569B | 公开（公告）日： | 2023-01-24 |
| 发明（设计）人： | 李雪玲;刘伟;李园园;韦朝春;陆长德;李亦学;贾犇;曹永梅 | 申请（专利权）人： | 上海产业技术研究院;上海旺旺食品集团有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速恒温检测阪崎克罗诺杆菌的方法、引物组及试剂盒。所述方法为：从待测样品中提取基因组DNA；以所述基因组DNA为模板，以能扩增阪崎克罗诺杆菌特异性序列的引物组为引物，在酶反应体系下进行恒温扩增反应；通过判断反应结果是否为阳性，确定待测样品中是否存在阪崎克罗诺杆菌。本发明检测方法具有高灵敏度和高特异性，检测时间短，结果判定简单，操作便捷，成本低，具广泛应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 阪崎克罗诺 杆菌 核酸 快速 恒温 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种快速恒温检测阪崎克罗诺杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)从待测样品中提取基因组DNA；/n(2)以所述基因组DNA为模板，以能扩增阪崎克罗诺杆菌基因组特异性碱基序列的引物组作为引物，在酶反应体系下进行恒温扩增反应；/n(3)通过判断反应结果是否为阳性，确定待测样品中是否存在阪崎克罗诺杆菌；/n其中，所述阪崎克罗诺杆菌基因组特异性碱基序列为GI号为156932229的阪崎克罗诺杆菌基因组的1077500～1080076bp位序列；/n其中；所述能扩增阪崎克罗诺杆菌基因组特异性碱基序列的引物组选自以下引物组M～R之任意一组；/n引物组M：/n上游外引物F3_M：5’-GCACTGCGTTCGTTACCT-3’(SEQ ID NO：49)；/n下游外引物B3_M：5’-GATGTATCCCTTGTTGGTGGAG-3’(SEQ ID NO：50)；/n上游内引物FIP_M：5’-GTACAGGCCAGGGTAAATGTACGTCCAGTTGCTGGTGAGCTT-3’(SEQ IDNO：51)；/n下游内引物BIP_M：5’-TGACCGGTATTTCGACCTGTATGCCAAGTGCGCAGACGAGAT-3’(SEQ IDNO：52)；/n引物组N：/n上游外引物F3_N：5’-CTGAAGTGATTCGGTTGC-3’(SEQ ID NO：53)；/n下游外引物B3_N：5’-GCGAATCTCTTAATCGATCA-3’(SEQ ID NO：54)；/n上游内引物FIP_N：5’-TTTTGAACAAGCCCGTAATGACGGCGTGTTTAAATCGAGA-3’(SEQ ID NO：55)；/n下游内引物BIP_N：5’-AACCTCAGCTTCTGCCTGTAATTAGTTGATGTTAACCGGG-3’(SEQ ID NO：56)；/n引物组O：/n上游外引物F3_O：5’-TATCATGTGCCTGAAGTGAT-3’(SEQ ID NO：57)；/n下游外引物B3_O：5’-GTTAACCGGGCAATGATT-3’(SEQ ID NO：58)；/n上游内引物FIP_O：5’-GTAATGACCTTGACGCAAAGCCTATTGGCGTGTTTAAATCG-3’(SEQ IDNO：59)；/n下游内引物BIP_O：/n5’-CAAAATTTAGTTCCTGAGAGGCAACGAAGAATGGCTGAATTTGAG-3’(SEQ ID NO：60)；/n引物组P：/n上游外引物F3_P：5’-AATTTGCTCACTCAGTTGTG-3’(SEQ ID NO：61)；/n下游外引物B3_P：5’-ATGACCGTTATCGTCAGG-3’(SEQ ID NO：62)；/n上游内引物FIP_P：5’-GCTTTTCCACAAACGATGGTGGTTGCAATATTTTTACCGGC-3’(SEQ IDNO：63)；/n下游内引物BIP_P：5’-TATAGTTCCATCCAAGGCTTACTCGTGTCACCAAAAACCACTAT-3’(SEQ IDNO：64)；/n引物组Q：/n上游外引物F3_Q：5’-TTTAGTTCCTGAGAGGCAA-3’(SEQ ID NO：65)；/n下游外引物B3_Q：5’-TGAGCAAATTAACCGGCT-3’(SEQ ID NO：66)；/n上游内引物FIP_Q：5’-GATGTTAACCGGGCAATGATTGGCTTCTGCCTGTACAATC-3’(SEQ ID NO：67)；/n下游内引物BIP_Q：5’-GATTCGCGAGCAATTTTTAGCTTTTCACAAACTGTCACCG-3’(SEQ ID NO：68)；/n引物组R：/n上游外引物F3_R：5’-GCAATTTTTAGCTGCTCTTG-3’(SEQ ID NO：69)；/n下游外引物B3_R：5’-GTAAGCCTTGGATGGAACT-3’(SEQ ID NO：70)；/n上游内引物FIP_R：5’-GTGAGCAAATTAACCGGCTTAAAAGAAGTAATGATCCCGGT-3’(SEQ IDNO：71)；/n下游内引物BIP_R：5’-GCAATATTTTTACCGGCACCACATATGGCTGGCTTTTCCA-3’(SEQ ID NO：72)。/n
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