[发明专利]猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用有效

专利信息
申请号: 201911157547.1 申请日: 2019-11-22
公开(公告)号: CN111057145B 公开(公告)日: 2021-10-08
发明(设计)人: 蔡雪辉;刘永刚;孙明霞;宋欢 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
主分类号: C07K16/10 分类号: C07K16/10;C12N15/13;A61K39/42;A61P31/14
代理公司: 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 代理人: 马鑫
地址: 150009 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用。所述的纳米抗体命名为Nb12,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明将截短表达的Nsp2重组蛋白免疫骆驼后分离骆驼外周血淋巴细胞利用RT‑PCR扩增经过免疫的双峰驼VHH基因,将其连入pCANTAB 5E噬菌体载体,构建双峰驼重链抗体可变区文库,利用噬菌体展示技术经过3轮淘选,共筛选到44株Nsp2特异性纳米抗体,试验证明这些纳米抗体能够与Nsp2蛋白特异性反应,其中Nb12有较强的结合力。抗病毒试验结果表明在接毒量为0.01个MOI时,纳米抗体Nb12在PAM细胞和Marc‑145细胞上均显示出对病毒复制的抑制作用。因此,本发明的提出为后续PRRSV Nsp2的研究以及PRRSV的防控和诊断提供了新的技术手段。
搜索关键词: 繁殖 呼吸 综合征 病毒 nsp2 蛋白 纳米 抗体 及其 应用
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