[发明专利]小鼠巨细胞病毒核酸检测方法在审
| 申请号： | 201911067290.0 | 申请日： | 2019-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN110684868A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 吕亚丽;刘丽宏;万子睿;安卓玲;刘河;贾阳杰;宫丽丽;玄玲玲;韩菲菲 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京朝阳医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 11369 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 100020*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种小鼠巨细胞病毒核酸检测方法，包括：S1、标准质粒的构建；S2、检测标准曲线的构建；S3、待检测样提取获得待检测DNA产物，以待检测DNA产物作为模板进行PCR扩增，获得待检测DNA基因引物扩增产物，待检测DNA基因引物扩增产物进行荧光定量PCR，获得C | ||
| 搜索关键词： | 检测 基因引物 扩增产物 小鼠巨细胞病毒 标准曲线 检测样 构建 定量检测细胞 鼠巨细胞病毒 荧光定量PCR 巨细胞病毒 标准质粒 定量检测 定性检测 核酸检测 小数 核酸 尿液 全血 小鼠 血浆 脏器 定性 | ||
【主权项】：
1.小鼠巨细胞病毒核酸检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、标准质粒的构建，其包括：/nS1.1、培养小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3细胞株获得单层小鼠NIH/3T3细胞，/n向单层小鼠NIH/3T3细胞中接种小鼠MCMV Smith病毒株，培养得病毒感染液，病毒感染液提取获得MCMV DNA产物；/nS1.2、以MCMV DNA产物作为模板进行PCR扩增，获得MCMV-ie基因引物扩增产物；/nS1.3、MCMV-ie基因引物扩增产物进行2％琼脂糖凝胶电泳后切胶回收目的DNA，得切胶回收产物，切胶回收产物连接PMD-18T载体，得连接产物，连接产物转化后进行质粒DNA提取，得标准质粒；/nS2、检测标准曲线的构建，具体为：将标准质粒用ddH
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