[发明专利]一种DNA恒温扩增方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201911065571.2 | 申请日： | 2019-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN110564823B | 公开（公告）日： | 2020-03-31 |
| 发明（设计）人： | 蒋健晖;王海波;唐丽娟 | 申请（专利权）人： | 湖南融健基因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 李渤;郭广迅 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市岳麓区洋*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种DNA恒温扩增方法，所述方法包括：（1）制备反应混合物；（2）将步骤（1）获得的反应混合物置于恒定温度下，在识别并切除双链DNA中的一条链内的非常规DNA碱基的酶和具有链置换功能DNA聚合酶的作用下，第一引物对和第二引物对以模板进行DNA扩增。本发明还涉及一种用于实施DNA恒温扩增方法的试剂盒。本发明所述的方法和试剂盒引物设计简单、能够在恒温下进行DNA扩增且扩增灵敏高效。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 恒温 扩增 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种DNA恒温扩增方法，所述方法包括：/n（1）制备反应混合物，其中所述反应混合物包括待扩增的DNA、第一引物对、第二引物对、三磷酸脱氧腺苷（dATP）、三磷酸脱氧鸟苷（dGTP）、三磷酸脱氧胞苷（dCTP）、三磷酸脱氧胸苷（dTTP）、识别并切除双链DNA中的一条链内的非常规DNA碱基的酶和具有链置换功能的DNA聚合酶；其中所述第一引物对包括分别与待扩增的DNA的上游端和下游端互补的一对引物，而且其中每一引物从5’端到3’端依次包含修饰部分和未修饰部分，其中在所述修饰部分中至少与未修饰部分相邻的常规DNA碱基被替换成非常规DNA碱基；所述第二引物对中的每一引物分别与第一引物对中的每一引物的修饰部分相同；/n（2）将步骤（1）获得的反应混合物置于恒定温度下，在识别并切除双链DNA中的一条链内的非常规DNA碱基的酶和具有链置换功能DNA聚合酶的作用下，第一引物对和第二引物对以模板进行DNA扩增。/n
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