[发明专利]一种水稻叶鞘原生质体高效转化基因模块和线路的方法在审
| 申请号： | 201910986195.4 | 申请日： | 2019-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN110656126A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 谷晓峰;刘青 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N5/04 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 白凤莹 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种水稻叶鞘原生质体高效转化基因模块和线路的方法。本发明公开了水稻叶鞘原生质体的转化方法，包括：在水稻叶鞘原生质体中添加MMg溶液，得到水稻叶鞘原生质体悬浮液；在水稻叶鞘原生质体悬浮液添加质粒和质量百分比为40％的聚乙二醇‑钙溶液，混匀，静置；加入W5溶液混匀，离心，弃上清，W5溶液重悬沉淀，离心，弃上清，加入羧苄青霉素混匀，培养，完成原生质体的转化。本发明水稻叶鞘原生质体转化方法对PEG溶液配制、质粒浓度及转化时间等进行调整，将转化效率提高到80％，可使智能改造元器件在80％植物细胞中发挥功能，对初期元器件功能研究提供了可用数据，为后期作物智能改造元器件作用研究提供了便利。 | ||
| 搜索关键词： | 水稻叶鞘 原生质体 混匀 元器件 悬浮液 质粒 转化 原生质体转化 质量百分比 羧苄青霉素 高效转化 功能研究 聚乙二醇 可用数据 植物细胞 转化效率 作用研究 智能 钙溶液 重悬 配制 沉淀 改造 便利 基因 | ||
【主权项】：
1.一种水稻叶鞘原生质体的转化方法，其特征在于，包括如下步骤：/nA1)在水稻叶鞘原生质体中添加MMg溶液，得到水稻叶鞘原生质体悬浮液；/nA2)在水稻叶鞘原生质体悬浮液中添加载体和质量百分比为40％的聚乙二醇-钙溶液，静置；其中，每100μL水稻叶鞘原生质体悬浮液加入大于等于100μg的载体和110μL聚乙二醇-钙溶液，所述每100μL水稻叶鞘原生质体悬浮液包含水稻叶鞘原生质体8×10
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