[发明专利]一种迟缓爱德华氏菌快速检测方法在审
| 申请号： | 201910979356.7 | 申请日： | 2019-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN110714058A | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 庞建虎;高威芳;张顺;蔡挺 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大学宁波华美医院(宁波市第二医院) |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 33261 杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 贺心韬 |
| 地址： | 315099*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种迟缓爱德华氏菌快速检测方法，属于病害微生物检测技术领域。它解决了现有检测迟缓爱德华氏菌费力、费时和低灵敏度等问题，一种迟缓爱德华氏菌快速检测方法，包括如下步骤：S01：提取待检测菌的基因组DNA；S02：将正向引物、反向引物、RPA探针、缓冲液和步骤S01中的基因组DNA混匀后，加入冻干酶粉，振荡混匀后离心，将上清液转移到反应管中，加入启动剂进行恒等温扩增反应，得到扩增产物；S03：将扩增产物稀释后滴加到LFD检测试纸条上的加样区，若出现阳性反应，则存在迟缓爱德华氏菌。本发明检测时间短等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 迟缓爱德华氏菌 基因组DNA 快速检测 等温扩增反应 检测技术领域 扩增产物稀释 病害微生物 检测试纸条 低灵敏度 反向引物 扩增产物 阳性反应 振荡混匀 正向引物 反应管 缓冲液 加样区 检测菌 启动剂 上清液 检测 滴加 冻干 混匀 酶粉 探针 费力 | ||
【主权项】：
1.一种迟缓爱德华氏菌快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS01：提取待检测菌的基因组DNA；/nS02：将正向引物、反向引物、RPA探针、缓冲液和步骤S01中的基因组DNA混匀后，加入冻干酶粉，振荡混匀后离心，将预混液转移到反应管中，加入启动剂进行恒等温扩增反应，得到扩增产物；/nS03：将扩增产物稀释后滴加到LFD检测试纸条上的加样区，若检测线上出现颜色，则存在迟缓爱德华氏菌。/n
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