[发明专利]高产反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌菌株及其构建方法有效
申请号: | 201910940707.3 | 申请日: | 2019-09-30 |
公开(公告)号: | CN110551672B | 公开(公告)日: | 2023-05-23 |
发明(设计)人: | 罗应刚;姜良珍;庞静;张国林 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/24;C12R1/19 |
代理公司: | 成都坤伦厚朴专利代理事务所(普通合伙) 51247 | 代理人: | 刘坤 |
地址: | 610041 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种高产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的大肠杆菌菌株的构建及应用。技术方案为:一种高产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的大肠杆菌,在所述大肠杆菌中引入L‑脯氨酸‑反式‑4‑羟化酶基因;所述大肠杆菌的putA基因、poxB基因、ldhA基因、pflB基因、pta基因、pdhR基因、adhE基因、aceA基因被敲除;对proB、proC基因的启动子和5'UTR序列进行编辑;对proA的5'UTR序列进行编辑;对proB基因引入I69E突变。使用本发明构建的工程菌及发酵方法,可以葡萄糖为原料,在不外加L‑脯氨酸等底物的情况下,从头开始高效合成反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸,最高产量可达4.82g/L。 | ||
搜索关键词: | 高产 反式 羟基 脯氨酸 大肠杆菌 菌株 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种高产反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌,其特征在于:在所述大肠杆菌中引入L-脯氨酸-反式-4-羟化酶基因;敲除大肠杆菌的putA基因、poxB基因、ldhA基因、pflB基因、pta基因、pdhR基因、adhE基因和aceA基因;对proB、proC基因的启动子和5'UTR序列进行编辑;对proA的5'UTR序列进行编辑;对proB基因引入I69E突变。/n
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