[发明专利]一种脐带间充质干细胞的分离培养方法在审
| 申请号： | 201910881502.2 | 申请日： | 2019-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN110577929A | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 张鹏成 | 申请（专利权）人： | 安徽科门生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 34119 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘勇 |
| 地址： | 230000 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离培养方法，包括以下步骤:S1、采集脐带，剔除血管后清洗干净，获得脐带基质；S2、将脐带基质剪成小块，加入胶原蛋白酶液消化15‑20min，然后终止消化；S3、离心，弃去上清液，向残留的组织块中加入组织块处理液，处理3‑5min后再次离心，弃去上清液，获得待培养组织块；S4、将待培养组织块进行接种培养，待细胞达到80‑90％融合度时去除组织块，消化、传代，得到脐带间充质干细胞。本发明既能缩短脐带间充质干细胞的提取时间，又能减少细胞的老化、损伤，使获得的细胞具有较高的增殖活性，有利于脐带间充质干细胞在体外的快速扩增。 | ||
| 搜索关键词： | 组织块 脐带间充质干细胞 脐带基质 上清液 细胞 消化 传代 胶原蛋白酶 分离培养 接种培养 增殖活性 处理液 融合度 扩增 脐带 去除 体外 小块 剔除 清洗 损伤 残留 老化 采集 血管 | ||
【主权项】：
1.一种脐带间充质干细胞的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、采集脐带，剔除血管后清洗干净，获得脐带基质；/nS2、将脐带基质剪成小块，加入胶原蛋白酶液消化15-20min，然后终止消化；/nS3、离心，弃去上清液，向残留的组织块中加入组织块处理液，处理3-5min后再次离心，弃去上清液，获得待培养组织块；/n所述组织块处理液包括下述原料：聚乙二醇，鼠李糖脂，泊洛沙姆188，PBS溶液；/nS4、将待培养组织块进行接种培养，待细胞达到80-90％融合度时去除组织块，消化、传代，得到脐带间充质干细胞。/n
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