[发明专利]一种基于光催化的无标记电化学生物传感器检测溶菌酶的新方法

摘要

建立了一种无标记、选择性好、特异性强、灵敏高的检测溶菌酶的电化学新方法，通过先把带巯基的捕捉链DNA通过硫金键结合在金电极上，然后将适配体链DNA与捕捉链DNA通过碱基互补配对形成双链，在溶菌酶存在的情况下，溶菌酶与适配体链DNA结合后形成G‑四连体，从而使适配体链DNA从双链中解链掉离。电极中余下的单链吸附在GO上，因为GO与碱基都有共同的六边形结构，它们能形成π结构的堆叠反应。最后将PB吸附到GO上，因为PB能通过π‑π键吸附到GO的表面，在绿光LED灯照射下，PB吸收能量，继而传递给溶液中的溶解氧产生¹O₂，¹O₂可导致电极表面的DNA单链的断裂，使电极表面对[Fe(CN)₆]^3‑/4‑的排斥减小，造成传质阻力减少，从而使电化学阻抗信号减小；当没有目标链存在时，[Fe(CN)₆]^3‑/4‑电化学阻抗信号无明显降低，基于此，可实现对溶菌酶的无标记检测。

主权项

1.一种基于光催化的无标记电化学生物传感器检测溶菌酶的新方法，其特征在于包括以下四个步骤：/n(1)将金电极打磨平整并清洁后滴涂4μM捕捉链DNA孵育一个小时；/n(2)在(1)所述的电极表面滴涂1μM适配体链DNA溶液继续孵育两个小时；/n(3)将(2)所述的电极浸入100nM溶菌酶溶液中继续孵育半个小时；/n(4)将(3)所述的电极浸入100μg/mL GO溶液中孵育半个小时；/n(5)将(4)所述的电极浸入100nM PB溶液继续孵育15分钟后，在室温下用LED绿灯光照15min，并用电化学工作站以电化学阻抗谱(EIS)法检测电化学信号，分析测定结果。/n