[发明专利]一种分离绵羊肺炎支原体的方法在审

专利信息
申请号: 201910832505.7 申请日: 2019-09-04
公开(公告)号: CN110452854A 公开(公告)日: 2019-11-15
发明(设计)人: 郝华芳;陈胜利;储岳峰;袁婷;颜新敏;刘永生 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/02;C12R1/35
代理公司: 11279 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 代理人: 贾慧娜<国际申请>=<国际公布>=<进入
地址: 730046甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明提供一种分离绵羊肺炎支原体的方法,包括以下步骤:(1)采集样品及样品处理,得到样品接种液;(2)鸡胚接种;(3)绵羊肺炎支原体的分离:收集接种后死亡鸡胚和/或9d后未死亡鸡胚,取鸡胚尿囊液进行绵羊肺炎支原体进行活菌检测,若收集鸡胚尿囊液绵羊肺炎支原体阳性,进行保存;若第1代鸡胚尿囊液均为阴性,则将收集鸡胚尿囊液盲传鸡胚,方法同上,若盲传3代仍为阴性,则判定样品为绵羊肺炎支原体阴性,弃去。本发明的方法操作简单,不需要配制成分复杂的绵羊肺炎支原体培养基,避免了现有技术分离培养基配制中常需要高压灭菌或配备大容量滤器等问题;本发明方法可获得不含动物血清的绵羊肺炎支原体。
搜索关键词: 绵羊肺炎支原体 鸡胚尿囊液 阴性 死亡鸡胚 配制 分离培养基 动物血清 高压灭菌 活菌检测 鸡胚接种 样品处理 样品接种 培养基 大容量 盲传 接种 判定 采集 保存 配备
【主权项】:
1.一种分离绵羊肺炎支原体的方法,其特征在于:包括以下步骤:/n(1)采集样品及样品处理,得到样品接种液;/n(2)鸡胚接种:将步骤(1)得到的样品接种液接种7-8日龄健康SPF鸡胚,接种后,将鸡胚置于孵化箱中继续培养;/n(3)绵羊肺炎支原体的分离:收集接种后死亡鸡胚和/或9d后未死亡鸡胚,取鸡胚尿囊液进行绵羊肺炎支原体进行活菌检测,若收集鸡胚尿囊液绵羊肺炎支原体阳性,进行保存;若第1代鸡胚尿囊液均为阴性,则将收集鸡胚尿囊液盲传鸡胚,方法同上,若盲传3代仍为阴性,则判定样品为绵羊肺炎支原体阴性,弃去。/n
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