[发明专利]冰草叶来源无菌材料的保存和复苏方法有效
| 申请号： | 201910828537.X | 申请日： | 2019-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN110384045B | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 曹云英;刘立军;许锦彪;杨建昌;王志琴;周蓉;朱秀茹;周文滔;赵李;何莹滢;武文䶮;萧楚健;杨建伟;高聪;虎玲萍 | 申请（专利权）人： | 南通大学;扬州大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 张雪 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种冰草叶来源无菌材料的保存和复苏方法，包括以下步骤：S1：冰草叶预处理后接种于诱导培养基上，培养10‑15d形成愈伤组织；S2：形成愈伤组织后，转接至继代培养基上，分别置于常温、4℃冷藏、或按慢冻方法置于‑20℃低温或‑80℃超低温冷冻条件下进行保存；S3：在不同温度下保存的愈伤组织分别转移到不同的复苏继代培养基上生长，正常温度下培养。本发明的方法经常温、低温或超低温保存的愈伤组织，可以延长保存时间，减少继代培养，相比常规定期继代培养大大减少工作量，还能保证愈伤组织正常恢复生长。 | ||
| 搜索关键词： | 草叶 来源 无菌 材料 保存 复苏 方法 | ||
【主权项】：
1.一种冰草叶来源无菌材料的保存和复苏方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：预处理后的冰草叶，切成小段，接种于诱导培养基上，培养10‑15d诱导形成愈伤组织；培养条件：温度25‑27℃、光照1200‑1500Lux；S2：形成愈伤组织后，转接至继代培养基上，分别至于常温、4℃低温冷藏、‑20℃低温或‑80℃超低温冷冻条件下进行保存；不同温度下保存的继代培养基，包含以下成分：MS培养基1L、NAA 0.5‑1mg、2,4‑D 0.3‑0.5mg、蔗糖30‑35g、甘露醇10‑30g、脱落酸25‑50μmol，其中，常温保存和低温保存时在所述继代培养基的基础上添加琼脂6.5‑7.5g；S3：在不同温度下保存的愈伤组织分别转移到不同的复苏继代培养基上生长，正常温度下培养。
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