[发明专利]人重组甲硫氨酸亚砜还原酶A蛋白的结构和构建方法在审
| 申请号: | 201910789543.9 | 申请日: | 2019-08-26 |
| 公开(公告)号: | CN110606895A | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
| 发明(设计)人: | 喻红;曹佳;徐延勇;赵小杰;刘梦婷;杜芬;李菲菲;刘雨;周瑞 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/70;C12N15/867;C07K1/22 |
| 代理公司: | 42222 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 艾小倩 |
| 地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种人重组甲硫氨酸亚砜还原酶A(MsrA)蛋白的结构和构建方法。本发明结构中含有一段人EpK肽的组成结构;MsrA的结构为无信号肽的213个氨基酸链,通过BamHI限制性内切酶识别序列的编码氨基酸连接成一完整的人EpK‑MsrA融合蛋白多肽链。本发明制备的重组EpK‑MsrA融合蛋白通过慢病毒感染清道夫受体B族I型基因敲除(SR‑BI‑/‑)小鼠的方式在肝脏中高表达并能分泌入血;分泌的EpK‑MsrA融合蛋白可特征性结合于高密度脂蛋白,从而增加HDL功能蛋白组分载脂蛋白AI、对氧磷酶1等含量及活性、降低血浆及HDL中的炎性组成成分,具有抗动脉粥样硬化性心血管疾病的作用。 | ||
| 搜索关键词: | 融合蛋白 分泌 限制性内切酶识别序列 甲硫氨酸亚砜还原酶 抗动脉粥样硬化 高密度脂蛋白 编码氨基酸 慢病毒感染 清道夫受体 载脂蛋白AI 心血管疾病 氨基酸链 对氧磷酶 功能蛋白 无信号肽 组成结构 多肽链 高表达 人重组 特征性 构建 敲除 小鼠 炎性 血浆 制备 肝脏 蛋白 | ||
【主权项】:
1.一种人重组甲硫氨酸亚砜还原酶A蛋白的结构,其特征在于:/n所述结构为重组的EpK-MsrA融合蛋白,其全长序列为280个氨基酸残基,所述EpK-MsrA融合蛋白基本结构,如SEQ ID NO.1所示,/n其中,6个His标签表现为His His His His His His;/n所述结构具体包括一段EpK肽的组成结构,如SEQ ID NO.2所示;/n人源性MsrA的结构为无信号肽的213个氨基酸链,通过BamHI限制性内切酶识别序列的编码氨基酸连接成一完整的EpK-MsrA融合蛋白多肽链;/n还包括在EpK肽前端的一段人源性载脂蛋白E即apoE的分泌肽序列,其结构如SEQ IDNO.3所示;/n通过6个His标签与EpK连接。/n
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