[发明专利]一种提取微量蝰蛇基因及其特异性检测方法在审
| 申请号： | 201910743574.0 | 申请日： | 2019-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN110387370A | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 陈则;朱崇日;易应磊;王德慧;罗敏;李鑫;卞聪华;范铁炯 | 申请（专利权）人： | 上海赛伦生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/686;C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海市汇业律师事务所 31325 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 201707 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了提取微量蝰蛇基因及其特异性检测方法，属于生物技术领域。本发明通过提取微量蝰蛇组织及其毒素中基因，分别使用不同引物对作为特异性引物，获得PCR扩增产物，随后通过琼脂糖凝胶电泳检测，PCR产物经测序后为蝰蛇特异性基因序列。本发明的检测方法具有特异性高，稳定性好，检测迅速，易于操作等优点，有利于规模化和自动化检测分析，是快速、特异的鉴别蝰蛇及其毒素的一种方法。 | ||
| 搜索关键词： | 特异性检测 毒素 基因 琼脂糖凝胶电泳检测 特异性基因序列 生物技术领域 特异性引物 检测分析 规模化 检测 测序 引物 鉴别 自动化 | ||
【主权项】：
1.一种提取微量蝰蛇毒基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1，取适量圆斑蝰蛇组织或蝰蛇毒作为样品，置于离心管内，加入适量纯水及终浓度为100μg/ml的蛋白酶K，37℃孵育，离心；步骤2，吸上清置于另一离心管内，随后加入等体积平衡酚，混匀，离心；步骤3，吸取上清水相置于另一离心管内，加入等体积1：1混合平衡酚：氯仿，随后混匀，离心；步骤4，吸取上清水相置于另一离心管内，加入等体积氯仿，混匀，离心；步骤5，吸上清水相于另一离心管，加入2.5倍体积冷无水乙醇冷冻保存10min以上，离心；步骤6，丢弃上清，室温凉干，加入纯水，室温溶解，备用。
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