[发明专利]双模板表面分子印迹材料同时脱除水溶性茶提取物中吡虫啉和啶虫脒的方法

摘要

本发明公开了双模板表面分子印迹材料同时脱除水溶性茶提取物中吡虫啉和啶虫脒的方法，所述方法包括制备双模板表面分子印迹材料、制备分子印迹吸附柱、制备茶提取物水溶液、过柱处理及吸附柱循环使用等步骤。本发明所述双模板表面分子印迹材料同时脱除水溶性茶提取物中吡虫啉和啶虫脒的方法能够特异性地脱除水溶性茶提取物中的吡虫啉和啶虫脒，且对茶提取物中的茶多酚具有较小的吸附作用，对吡虫啉和啶虫脒的脱除率分别大于95％和94％，对提取物中茶多酚的损失小于14％。此外，本发明所制备的吸附柱可以通过甲醇/乙酸溶液进行洗脱，洗脱之后的吸附柱可以重新利用，因此能够很好地应用于茶提取物的制备工艺中，具有很好的应用前景。

主权项

1.双模板表面分子印迹材料同时脱除水溶性茶提取物中吡虫啉和啶虫脒的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n第1步、制备改性硅胶载体/n将100-600目的硅胶2-8g与50-200mL6-10molL^-1盐酸搅拌18-24h，真空抽滤并洗至pH为中性后于烘箱中100-120℃干燥4-8h，以获得活化硅胶；/n将2-8g活化硅胶与20-100mL无水甲苯混合于三颈烧瓶中，在氮气保护下磁力搅拌并逐滴滴加3-12mL3-氨丙基三乙氧基硅烷，滴入5-10mL吡啶，混合物在80-120℃加热回流12-30h，产物过滤并依次用甲苯、丙酮、乙醚和甲醇洗涤，然后于烘箱中80-120℃干燥4-12h，以获得氨基改性硅胶；/n将2-8g氨基改性硅胶与50-200mL无水甲苯混合于三颈烧瓶中，在氮气保护下磁力搅拌5-20min，之后逐滴滴加4-16mL丙烯酰氯，继续磁力搅拌15min，然后缓慢滴加2-8mL三乙胺作为催化剂，室温下反应12-30h，产物过滤并依次用甲苯、丙酮、乙醚和甲醇洗涤，然后于烘箱中80-120℃干燥4-12h，以获得酰基改性硅胶；/n第2步、制备双模板表面分子印迹/n将吡虫啉和啶虫脒共同溶解于甲苯中，加入2-8mmolα-甲基丙烯酸和400-1000mg酰基改性硅胶，均匀溶解后于0-4℃冷藏6-18h。之后继续加入12-28mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯和20-60mg偶氮二异丁腈，混合均匀后超声10-30min，通入高纯氮气10-30min，密封后于水浴锅中55-65℃聚合16-32h，获得的固体用甲醇洗涤至中性，于真空干燥箱中60℃进行干燥。干燥后的分子印迹粉末通过索氏提取法洗脱至无模板分子洗出，洗脱溶剂为甲醇-乙酸按体积比9:1混合的溶液；/n第3步、制备分子印迹固相吸附柱/n将500-2000mg第2步制备的双模板表面分子印迹粉末与2-8mL去超纯水混匀后，装入已装填下筛板的SPE小柱中，待所有液体流出后压入上筛板，以获得分子印迹固相吸附柱。用甲醇对吸附柱进行活化，将活化后的吸附柱放置待用；/n第4步、制备添加吡虫啉和啶虫脒的茶提取物水溶液/n将水溶性茶提取物配制成10-60wt％的水溶液，添加吡虫啉和啶虫脒使其浓度分别为1-20μg·mL^-1，并用0.45μm滤膜过滤，将过滤液收集备用；/n第5步、过柱/n将第4步制备的茶提取物水溶液通过第3步制备的活化后的分子印迹固相吸附柱，调节并控制流速，吸附柱温度控制在20-30℃，之后用2-8倍柱体积的超纯水对弱吸附于固相柱上的茶提取物进行洗脱，洗脱液与过柱液合并后进行检测，水溶性茶提取物的损失小于14％，对吡虫啉和啶虫脒的脱除率分别大于95％和94％；/n第6步、循环使用/n将第5步吸附有吡虫啉和啶虫脒的吸附柱通过30mL甲醇-乙酸体积比为9:1的混合溶剂，调节并控制流速为0.5-3mL·min^-1，将吸附柱中95％以上的吡虫啉和92％以上的啶虫脒洗脱，使该吸附柱循环使用。/n