[发明专利]一种表达腈水合酶突变体的重组菌及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910706255.2 | 申请日： | 2019-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN111690675B | 公开（公告）日： | 2022-07-19 |
| 发明（设计）人： | 董亢;濮梦华;李文兵;夏华跃;夏斌;李习红 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞邦生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N9/88;C12N15/60;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 芜湖思诚知识产权代理有限公司 34138 | 代理人： | 杨涛 |
| 地址： | 243100 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表达腈水合酶突变体的重组菌及其制备方法和应用，制备方法包括易错PCR法构建基因随机突变质粒文库，转化阳性克隆的筛选，经过酶活、蛋白电泳检测，水合小试验证筛选等步骤最终成功获得了表达腈水合酶突变体蛋白的重组大肠杆菌。本发明以高产腈水合酶大肠杆菌的基因组为模板，采用易错PCR技术重组构建随机突变质粒文库，从库中筛选腈水合酶突变体基因，该重组基因转化进入工程菌中后可高效诱导表达腈水合酶突变体蛋白。以高表达腈水合酶突变体编码基因的重组工程菌在经诱导表达后获得的菌体为酶源，在适合条件下进行水合反应生产烟酰胺，副产物烟酸低90％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 水合 突变体 重组 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
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