[发明专利]一种表达腈水合酶突变体的重组菌及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201910706255.2 | 申请日: | 2019-08-01 |
| 公开(公告)号: | CN111690675B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
| 发明(设计)人: | 董亢;濮梦华;李文兵;夏华跃;夏斌;李习红 | 申请(专利权)人: | 安徽瑞邦生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12N9/88;C12N15/60;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司: | 芜湖思诚知识产权代理有限公司 34138 | 代理人: | 杨涛 |
| 地址: | 243100 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 表达 水合 突变体 重组 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种表达腈水合酶突变体的重组菌,其特征在于:所述重组菌表达合成腈水合酶突变体,所述腈水合酶突变体的氨基酸序列为SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQID No.5中的一种。
2.一种烟酰胺制备方法,其特征在于,以权利要求1中所述的表达腈水合酶突变体的重组菌为酶源生产烟酰胺,具体步骤如下:
将菌体加入纯水中重悬,20℃保温,以70wt%3-氰基吡啶水溶液为反应底物,初始流速40g/min流加,反应过程中根据反应液中3-氰基吡啶的含量降低流速,20±2℃持续反应得烟酰胺,副产物烟酸降低90%以上。
3.根据权利要求2中所述的一种烟酰胺制备方法,其特征在于:所述反应液中的腈水合酶突变体的酶活终浓度70U/mL,所述纯水采用液碱调至pH 8.0±0.2,所述反应底物由双蒸水配置,50℃水浴保温,3-氰基吡啶终浓度为反应底物的30wt%。
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