[发明专利]提高花生毛状根花生分泌肽含量的方法在审
| 申请号： | 201910702364.7 | 申请日： | 2019-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN110408651A | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 徐扬;于子鹏;张智猛;戴良香;慈敦伟;丁红;秦斐斐 | 申请（专利权）人： | 山东省花生研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/06;A01H6/54 |
| 代理公司： | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人： | 张洁 |
| 地址： | 266100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种提高花生毛状根花生分泌肽含量的方法，属于基因工程领域。本发明通过从花生中克隆出分泌肽基因，构建植物基因表达载体后，利用发根农杆菌介导的方法获得含花生分泌肽基因的花生毛状根，并鉴定转基因花生毛状根中花生分泌肽基因的表达，测定花生毛状根的生物量，用Tricine SDS‑PAGE法测定花生分泌肽的表达水平，用BCA蛋白质定量检测法测定花生分泌肽的含量。本发明利用花生毛状根系统生产花生分泌肽具有操作简单、周期短、产量高、成本低且产物具有生物学活性等优点，是比较经济、高效的花生分泌肽制备方法。 | ||
| 搜索关键词： | 花生 分泌肽 毛状根 基因 植物基因表达载体 发根农杆菌介导 基因工程领域 蛋白质定量 生物学活性 转基因花生 表达水平 系统生产 检测法 生物量 构建 制备 克隆 | ||
【主权项】：
1.提高花生毛状根花生分泌肽含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：从花生cDNA中克隆出花生分泌肽基因后，将所述花生分泌肽基因连接到表达载体上，构建含花生分泌肽基因的植物表达载体；将含花生分泌肽基因的植物表达载体转化至发根农杆菌，获得含花生分泌肽基因的发根农杆菌；利用含花生分泌肽基因的发根农杆菌菌液侵染花生叶片，得到被含花生分泌肽基因的发根农杆菌菌液侵染的花生叶片后，诱导其产生转基因花生毛状根，转入MS培养基中培养；鉴定所述转基因花生毛状根中花生分泌肽基因是否表达后，测定转基因花生毛状根生产花生分泌肽的能力和含量。
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