[发明专利]TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法有效
| 申请号： | 201910630368.9 | 申请日： | 2019-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN110499325B | 公开（公告）日： | 2021-04-23 |
| 发明（设计）人： | 潘会堂;司未佳;张启翔;申建双;刘颖;程堂仁;王佳 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/02;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 黄爽 |
| 地址： | 100083 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种TRV‑based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括：A、根据报春花属植物目标基因，设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段；B、将DNA片段连接到pTRV2载体上，得到重组载体；C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌，所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证，为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系，获得目的表型效率高，可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比，本发明表型持续时间长，且在植株的不同部位均出现表型变化，对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | trv based 病毒 诱导 报春花 植物 基因 沉默 方法 | ||
【主权项】：
1.TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nA、根据报春花属植物目标基因，设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段；/nB、将上述DNA片段连接到pTRV2载体上，得到重组载体；/nC、将上述重组载体、pTRV1载体分别转化农杆菌，得到的转化子共同侵染植株，经检测具有病毒载体且目的基因表达量显著降低的植株，即为目标基因沉默的植株。/n
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