[发明专利]一种发光细菌的生长作用和急慢性毒性检测方法在审
| 申请号： | 201910623712.1 | 申请日： | 2019-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN110441292A | 公开（公告）日： | 2019-11-12 |
| 发明（设计）人： | 袁楠楠;鲍安平 | 申请（专利权）人： | 南京信息职业技术学院 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76;G01N21/31;G01N1/34;G01N1/38 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 董建林 |
| 地址： | 210023 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种发光细菌的生长作用和急慢性毒性检测方法，包括步骤：制备实验样品、阴性对照样品和阳性对照样品；制备发光细菌菌液；将发光细菌菌液加到96孔细胞培养板中，然后置于酶标仪，30min后测定初始光密度值和初始生物发光值；向发光细菌菌液中加入实验样品、阴性对照样品和阳性对照样品，前1h每30min测一次光密度值和生物发光值，随后每1h测一次，测试不低于24h；获取光密度突变时间和生物发光突变时间；计算急性发光抑制率、慢性发光抑制率和生长抑制率。本发明可同时评估待测物质对发光细菌的生长作用、急性和慢性毒性效应，准确率高，实现了毒性测试的高通量化，测试效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 发光细菌 生物发光 菌液 阳性对照样品 阴性对照样品 毒性检测 实验样品 急慢性 抑制率 制备 生长 突变 发光 测试效率 毒性测试 慢性毒性 生长抑制 酶标仪 一次光 准确率 高通 测试 量化 评估 | ||
【主权项】：
1.一种发光细菌的生长作用和急慢性毒性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：制备若干不同浓度的实验样品、阴性对照样品和阳性对照样品；在无菌条件下制备发光细菌菌液；将所述发光细菌菌液加入到96孔细胞培养板中，然后将96孔细胞培养板置于酶标仪中，30min后测定初始光密度值和初始生物发光值；向发光细菌菌液中加入实验样品、阴性对照样品和阳性对照样品，前1h每30min测一次光密度值和生物发光值，随后每1h测一次，测试不低于24h，测试过程中每5～10min振动一次96孔细胞培养板；做出阴性对照样品的光密度值和生物发光值随时间变化曲线，分别获得光密度突变时间和生物发光突变时间；根据实验样品的生物发光值计算急性发光抑制率，根据实验样品在所述生物发光突变时间的生物发光值计算发光细菌的慢性发光抑制率，根据实验样品在所述光密度突变时间的光密度值计算发光细菌的生长抑制率。
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