[发明专利]一种核酸片段分选纯化试剂及方法有效
| 申请号： | 201910614854.1 | 申请日： | 2019-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN110317805B | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 尹华立;裘惠良 | 申请（专利权）人： | 杭州千基生物科技有限公司;杭州博芯生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 万尾甜;韩介梅 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州市萧山*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种核酸片段分选纯化试剂及方法，该试剂包括磁珠结合液、洗涤液、洗脱液，可用于对混合物样本中不同区段靶向核酸片段的分选、纯化，所述靶向核酸片段分选步骤如下：将含不同区段的第一核酸混合物与磁珠结合液混匀，室温放置后，再置于磁力架上静置，弃上清液，洗涤、洗脱；所述的第一核酸混合物与磁珠结合液的体积混合比为1:1.2‑0.45。此外还可根据需要选择是否进行第二步分选，即取第一核酸混合物与磁珠结合分离后的上清液作为第二核酸混合物，再次进行结合分离、洗涤、洗脱；可通过调整加入的磁珠结合液的体积分选不同区段的靶向核酸片段。本发明提供的试剂及方法可用于下游的核酸片段分析及二代测序平台文库构建等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 片段 分选 纯化 试剂 方法 | ||
【主权项】：
1.一种核酸片段分选纯化试剂，其特征在于，包含以下组分：磁珠结合液、洗涤液、洗脱液；所述的磁珠结合液为含10‑500mM 4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、0.5‑2.5M盐酸胍、1‑50％(W/V)且分子量范围为200‑20000的聚乙二醇、1‑50mM氯化锂、1‑50mM氯化镁、0.5‑25％(V/V)的无水乙醇及5‑50mg/ml磁性颗粒；洗脱液为无DNase与RNase酶无菌水或tris缓冲液或TE缓冲液。
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