[发明专利]PD-L1抗原免疫羊驼制备PD-L1纳米抗体的方法在审
| 申请号： | 201910604225.0 | 申请日： | 2019-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN110256564A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 陈创夫;吴鹏 | 申请（专利权）人： | 石河子大学 |
| 主分类号： | C07K16/28 | 分类号： | C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;A61K47/68 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 832003 新疆维*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明属于抗体技术领域，公开了一种PD‑L1抗原免疫羊驼制备PD‑L1纳米抗体的方法，设计合成引物2条，通过PCR的方法扩增出足够量的目的产物换载酶切，目的片段与载体连接，转化，筛选克隆；蛋白鉴定表达；构建抗体库；选用M13噬菌体展示系统展示VHH抗体文库，该系统由pMECS噬菌粒载体、E.coli TG1和M13KO7辅助噬菌体组成。本发明在噬菌粒载体pMECS中，Pst I酶切位点之前的序列为pelB分泌信号肽和抗体第一个框架区部分氨基酸的编码序列，pelB信号肽能够将后续多肽引导分泌至周质腔；Not I酶切位点之后是HA和6×His标签的编码序列，可用于融合蛋白的纯化或检测。 | ||
| 搜索关键词： | 噬菌粒载体 编码序列 酶切位点 纳米抗体 制备 设计合成引物 分泌信号肽 辅助噬菌体 蛋白鉴定 抗体技术 抗体文库 抗原免疫 目的片段 融合蛋白 载体连接 展示系统 抗体库 框架区 信号肽 周质腔 氨基酸 多肽 构建 抗体 可用 扩增 酶切 分泌 克隆 筛选 检测 转化 展示 | ||
【主权项】：
1.一种通过哺乳动物细胞表达PD‑L1抗原免疫羊驼制备PD‑L1纳米抗体的方法，其特征在于，所述的通过哺乳动物细胞表达PD‑L1抗原免疫羊驼制备PD‑L1纳米抗体的方法包括：通过PD‑L1抗原为哺乳动物细胞瞬时转染表达，使用生物素化方法筛选得到纳米抗体片段SEQ ID NO：1。
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