[发明专利]一种高赖氨酸玉米自交系的选育方法

摘要

本发明公开了一种高赖氨酸玉米自交系的选育方法。本发明提供了一种选育高赖氨酸含量的玉米自交系的方法，利用OE2‑4标记进行高赖氨酸o2基因的分子标记辅助选择，可以在回交转育过程的回交群体中鉴定筛选到基因型为O2o2的个体，在自交分离群体中鉴定筛选到基因型为o2o2的个体，比利用常规化学分析法进行高赖氨酸表型数据检测成本低、速度快，且不需要对等到适采期籽粒灌浆结束以后剥取籽粒，避免对果穗产生破坏。

主权项

1.一种选育高赖氨酸含量的玉米自交系的方法，包括如下步骤：1)以高赖氨酸玉米自交系作为非轮回亲本，非高赖氨酸玉米自交系作为轮回亲本，杂交后进行第一次回交，得到BC1代群体；再将所述BC1代群体按照如下1)‑a至1)‑c的步骤鉴定：1)‑a、检测所述BC1代群体的SNP位点OE2‑4基因型为TT、GG还是TG，选取SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC1代单株；所述SNP位点OE2‑4为玉米基因组中o2基因的第五外显子区域第2137位；1)‑b、将所述SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC1代单株进行第一次SSR扩增，得到SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC1代单株的SSR扩增图谱；所述第一次SSR扩增的SSR引物对为表3所示的40对SSR引物对中对所述非轮回亲本和所述轮回亲本存在差异扩增图谱的SSR引物对；1)‑c、将所述SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC1代单株的SSR扩增图谱和采用所述第一次SSR扩增的SSR引物对扩增所述轮回亲本的SSR扩增图谱进行比较，选取与所述轮回亲本的差异等位基因数按照从小到大排列后前10个单株作为下一步回交的母本，记作BC1代‑A单株；所述差异等位基因数为SSR扩增图谱谱带不一致的等位基因数目；2)以所述BC1代‑A单株作母本，和所述轮回亲本进行第二次回交，得到BC2代群体；再将所述BC2代群体按照如下2)‑a至2)‑c的步骤鉴定：2)‑a、检测所述BC2代群体的SNP位点OE2‑4基因型为TT、GG还是TG，选取SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC2代单株；2)‑b、将所述SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC2代单株进行第二次SSR扩增，得到SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC2代单株的SSR扩增图谱；所述第二次SSR扩增的SSR引物对为表3所示的40对SSR引物对中对所述非轮回亲本和所述BC1代‑A单株存在差异扩增图谱的SSR引物对；2)‑c、将所述SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC2代单株的SSR扩增图谱和采用所述第二次SSR扩增的SSR引物对扩增所述轮回亲本的SSR扩增图谱进行比较，选取与所述轮回亲本无差异等位基因的单株作为下一步回交的母本，记作BC2代‑A单株；3)以所述BC2代‑A单株作母本，和所述轮回亲本进行第三次回交，得到BC3F1代群体；再将所述BC3代群体按照如下3)‑a至3)‑b的步骤培育：3)‑a、检测所述BC3F1代群体的SNP位点OE2‑4基因型为TT、GG还是TG，选取SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC3F1代单株；3)‑b、将所述SNP位点OE2‑4基因型为TG的BC3F1代单株自交，得到BC3F2代；检测所述BC3F2代群体的SNP位点OE2‑4基因型，选取SNP位点OE2‑4基因型为TT的BC3F2代单株；3)‑c、所述SNP位点OE2‑4基因型为TT的BC3F2代单株自交，得到高赖氨酸的玉米自交系。