[发明专利]一种竹荪孢子中活性成分连续制备工艺

摘要

本发明公开了一种竹荪孢子中活性成分连续制备工艺。在多糖提取工艺的基础上进行优化，将除蛋白环节设计为第一步提取获得蛋白；脱脂环节设计为利用醇沉后回收的乙醇再次提取；同时针对醇沉这个步骤中，乙醇除了可以沉淀多糖，还会萃取溶液中的小分子类活性物质，因此对乙醇相进行进一步的分离提取获得不同种类的活性成分。本发明设计的一套提取工艺路线，可以对竹荪孢子连续提取，依次可以获得多肽、多糖、小分子活性物质等多个有价值的成分，达到充分利用竹荪孢子的目的。

主权项

1.一种竹荪孢子中活性成分连续制备工艺，其特征在于：包括以下步骤：（1）将竹荪孢子水洗，喷雾干燥后，采用超微粉碎至粒径为1000~100纳米，将破壁竹荪孢子粉加入软水后，调节pH 7‑9，超声提取，超声功率300‑1000W，提取温度50‑70℃，超声时间20‑90min，然后3000r/min离心，获得上清液为竹荪孢子多糖蛋白溶液，沉淀为孢子残渣低温保存另用；（2）竹荪孢子多糖蛋白溶液加入低浓度盐酸，调整pH至4.3，搅拌后静置使蛋白沉淀，5000r/min离心，上清液为竹荪孢子多糖溶液，沉淀即为竹荪孢子蛋白；（3）将竹荪孢子蛋白加水溶解后，调节pH 7.5，加入竹荪孢子蛋白重量1.50%水解酶，保持温度45 ℃酶解4.0 h，酶解后获得蛋白分子量为5.8 ~ 30 kDa的竹荪孢子多肽；（4）竹荪孢子多糖溶液加碱调节pH 7.5，60℃真空浓缩至原体积20%，加入4倍体积无水乙醇，充分搅拌后静置12h，5000r/min离心，沉淀即为竹荪孢子多糖，乙醇上清液备用；（5）将步骤（4）的乙醇上清液45℃真空浓缩至原体积10%，获得浸膏Ⅰ；（6）回收步骤（5）乙醇，按30:1 ml/g加入步骤（1）的孢子残渣，超声提取，超声功率500W，45℃下提取60min，然后3000r/min离心，将乙醇上清液45℃真空浓缩至原体积10%，获得浸膏Ⅱ；（7）将浸膏Ⅰ和浸膏Ⅱ合并，依次用氯仿、乙酸乙酯、甲醇在常温下浸提，回收有机溶剂后分别获得甾醇、三萜、黄酮活性小分子物质。