[发明专利]一种褐藻胶裂解酶突变体及其应用有效

专利信息
申请号: 201910425967.7 申请日: 2019-05-21
公开(公告)号: CN110004134B 公开(公告)日: 2020-12-25
发明(设计)人: 林娟;曾德样;许鑫琦 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: C12N9/88 分类号: C12N9/88;C12P19/12;C12P19/02;C12P19/00
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 饶文君;蔡学俊
地址: 350108 福建省福州市闽*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明涉及一种褐藻胶裂解酶突变体及应用,属于酶工程和基因工程领域,该突变体在序列SEQ ID NO.3基础上将第226位E突变为K,经过表达,突变体酶活提高1.11倍,粗酶液经过纯化后比活力较截短酶AlgL‑T157N提高1.03倍;突变体最适温度55℃,在pH 6.0‑8.0内保温1 h酶活力基本不变,具有较强pH稳定性;突变体对褐藻酸钠、Poly M和Poly G的催化效率Kcat/Km分别比AlgL‑T157N提高10.22、8.59、2.97倍。本发明采用结构序列分析和软件辅助筛选相结合的方法,确定突变位点,通过PCR定点突变得到催化活性提高的突变体,为其进一步的工业化应用奠定基础。
搜索关键词: 一种 褐藻 裂解 突变体 及其 应用
【主权项】:
1.一种褐藻胶裂解酶突变体,其特征在于:所述突变体是在褐藻胶裂解酶截短酶AlgL‑T157N氨基酸序列SEQ ID NO.3基础上,将第226位谷氨酸定点突变为赖氨酸,其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
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