[发明专利]利用ccdB致死基因快速构建重组质粒的试剂盒在审
| 申请号： | 201910387486.1 | 申请日： | 2019-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN110305885A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 苏丹;江华;卢德仁 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/70 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610065 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物学领域，具体涉及利用ccdB致死基因快速构建重组质粒的方法和试剂盒。本发明使用PCR和菌体内同源重组的机制相结合，摆脱了载体构建中对DNA酶切和连接的依赖；引入ccdB致死基因，简化了阳性克隆的筛选。本发明可用于高通量的载体构建，具有省时、省力、低成本的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 致死基因 快速构建 载体构建 重组质粒 试剂盒 分子生物学领域 体内同源重组 阳性克隆 低成本 高通量 可用 省时 省力 筛选 引入 | ||
【主权项】：
1.一种利用ccdB致死基因快速构建重组质粒的试剂盒，其特征在于，包括：1)带ccdB基因表达盒子的环状载体：由ccdB基因表达盒子和表达载体构成；2)载体扩增引物HF和HR；所述载体扩增引物用于扩增表达载体；所述ccdB基因表达盒子是含有启动子、ccdB基因和抗生素A的抗性基因的DNA分子；所述表达载体不含抗生素A的抗性基因，而含有抗生素B的抗性基因。
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