[发明专利]一种从商陆中提取纯化商陆抗病毒蛋白的方法在审
| 申请号： | 201910384278.6 | 申请日： | 2019-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN110016470A | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 张春发;黄超;秦人胜;邓柳红;高海波;陈吉良;王胜 | 申请（专利权）人： | 江苏森瑞谱生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24 |
| 代理公司： | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人： | 张耀婷;莫臻 |
| 地址： | 225300 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属医药领域，涉及一种从商陆中提取纯化商陆抗病毒蛋白的方法，是取商陆叶片提取总蛋白后用硫酸铵盐析出得到商陆抗病毒粗蛋白，将商陆抗病毒粗蛋白溶解于Tris‑HCl缓冲液后，采用阴离子交换层析、阳离子交换层析进一步纯化，洗脱得到商陆抗病毒蛋白溶液，超滤浓缩，真空冷冻干燥得到纯度大于或等于99％的商陆抗病毒蛋白。本发明采用盐析粗纯化后进行阴离子交换层析、阳离子交换层析进一步纯化的工艺路径，获得纯度大于或等于99％的商陆抗病毒蛋白，解决了现有技术中提取商陆抗病毒蛋白的纯度低及缺乏高纯度商陆抗病毒蛋白对照品和标准品的问题，具有良好的临床应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 商陆抗病毒蛋白 商陆 阳离子交换层析 阴离子交换层析 提取纯化 粗蛋白 抗病毒 真空冷冻干燥 提取总蛋白 析出 超滤浓缩 工艺路径 临床应用 硫酸铵盐 医药领域 标准品 对照品 高纯度 缓冲液 洗脱 盐析 叶片 溶解 | ||
【主权项】：
1.一种从商陆中提取纯化商陆抗病毒蛋白的方法，其特征在于，具体步骤如下：1)取商陆叶片，采用1:1～3比例加入蛋白提取缓冲液匀浆提取总蛋白，取上清，30～45％硫酸铵盐析离心去除大部分杂质后，再采用80～95％的硫酸铵盐析出得到商陆抗病毒粗蛋白；2)将商陆抗病毒粗蛋白溶解于PH为7.2～7.7的Tris‑HCl缓冲液，脱盐过滤后，先采用阴离子交换层析纯化，洗脱后再采用阳离子交换层析进一步纯化，洗脱得到商陆抗病毒蛋白溶液；3)商陆抗病毒蛋白溶液采用超滤浓缩，真空冷冻干燥得到纯度大于或等于99％的商陆抗病毒蛋白。
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