[发明专利]一种利用RNase H检测(CAG)n重复序列的方法有效

专利信息
申请号: 201910312488.4 申请日: 2019-04-18
公开(公告)号: CN110055305B 公开(公告)日: 2021-01-29
发明(设计)人: 杨兆琪;胡前行;秦兰;朱诗宇;仇丽蓉;苏咏欣;金坚 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12Q1/6804 分类号: C12Q1/6804;G01N33/53
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 林娟
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种利用RNase H检测(CAG)n重复序列的方法,属于分子生物学技术领域。本发明的方法通过(CAG)n与荧光素标记的互补RNA适配体混合;限制性核酸内切酶RNase H的酶切反应:(CAG)n与适配体的混合溶液中与限制性核酸内切酶RNase H溶液混匀、孵育;荧光检测:经酶切反应的溶液加入氧化石墨烯,混匀、孵育,得到待检测溶液,用荧光分光光度计检测荧光强度。本发明方法操作简单、检测快速且灵敏度高,对含(CAG)n的检出限达1.12×10‑10mol/L,本发明检测含(CAG)n的DNA序列具有非常高的特异性。
搜索关键词: 一种 利用 rnase 检测 cag 重复 序列 方法
【主权项】:
1.一种亨廷顿舞蹈症特征基因的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将待测样品与荧光素标记的RNA适配体溶液混匀;所述RNA含有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;(2)向步骤(1)的混合溶液中加入核糖核酸内切酶RNase H,孵育至少2min;(3)向步骤(2)的酶切反应产物中加入氧化石墨烯,混匀、孵育,得到待检测溶液,在激发波长为480nm,检测波长520nm的条件下检测荧光强度。
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