[发明专利]一种基于芽孢杆菌表达系统高效表达灵杆菌非特异性核酸酶的方法在审
| 申请号： | 201910212588.X | 申请日： | 2019-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN109852633A | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 龚雪梅;薛勇;罗志丹;胡艳红;张慧铭;韩挺翰;张晨蕾 | 申请（专利权）人： | 淮海工学院;江苏愚公生命科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/56;C12N9/22;C12Q1/34 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 曹征贵 |
| 地址： | 222000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开一种基于芽孢杆菌表达系统高效表达灵杆菌非特异性核酸酶的方法，其特征在于：包括以芽孢杆菌作为宿主表达体系，利用芽孢杆菌胞外分泌能力实现灵杆菌非特异性核酸酶的高效表达；本发明重组表达出的灵杆菌非特异性核酸酶，比活力是目前商业化产品的3倍，本发明选用的芽孢杆菌分泌表达系统，从根本上解决了由其他表达系统自身特性所引入的内毒素及糖基化修饰等影响酶活或限制其应用的缺陷，高效的分泌型表达无需破碎细胞，纯化步骤更为简便，可以线性放大，便于规模性生产，值得推广。 | ||
| 搜索关键词： | 非特异性 核酸酶 灵杆菌 高效表达 芽孢杆菌 芽孢杆菌表达系统 内毒素 分泌表达系统 分泌型表达 规模性生产 糖基化修饰 胞外分泌 表达系统 破碎细胞 宿主表达 线性放大 重组表达 酶活 引入 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于芽孢杆菌表达系统高效表达灵杆菌非特异性核酸酶的方法，其特征在于：包括以芽孢杆菌作为宿主表达体系，利用芽孢杆菌胞外分泌能力实现灵杆菌的非特异性核酸酶的高效表达，具体步骤如下：步骤1：通过人工合成或者PCR扩增获取灵杆菌非特异性核酸酶基因；步骤2：构建灵杆菌非特异性核酸酶的组成型表达质粒；步骤3：构建灵杆菌非特异性核酸酶的重组表达菌株；步骤4：灵杆菌非特异性核酸酶的重组表达；步骤5：灵杆菌非特异性核酸酶的纯化；步骤6：灵杆菌非特异性核酸酶的活力检测。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于淮海工学院;江苏愚公生命科技有限公司，未经淮海工学院;江苏愚公生命科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910212588.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
