[发明专利]肠道病毒D组68型VP1单克隆抗体的序列及其应用有效
| 申请号： | 201910211598.1 | 申请日： | 2019-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN110078821B | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 王涛;徐亚楠;王志云;刘思华 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C12N15/13;G01N33/577;G01N33/569 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 琪琛 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肠道病毒D组68型VP1单克隆抗体的序列及其应用，利用提取EV‑D68病毒基因组RNA，通过反转录和PCR扩增得到VP1基因的cDNA，将其克隆到克隆载体，再转入表达载体得到重组表达质粒，转化宿主菌并用IPTG诱导蛋白表达，表达产物通过包涵体的提取、变性、纯化得到可以作为鉴别诊断抗原的VP1融合蛋白。利用重组VP1蛋白作为免疫原，免疫BALb/c小鼠取免疫小鼠脾脏并将其与骨髓瘤细胞SP2/0融合，获得了可表达VP1抗体的杂交瘤细胞株，此细胞能够稳定分泌单克隆抗体，通过流式细胞术来检测抗体的免疫原性。本发明同时获得了VP1单克隆抗体的H链、L链可变区核苷酸及氨基酸序列。 | ||
| 搜索关键词： | 肠道病毒 68 vp1 单克隆抗体 序列 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.肠道病毒D组68型VP1单克隆抗体的可变区序列，其特征在于所述的抗体包括重链可变结构域VH和轻链可变结构域VL；其中，重链可变结构域VH的核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO：2；重链可变结构域VH依次包含高变区FRH1、CDRH1、FRH2、CDRH2、FRH3、CDRH3和FRH4，所述的核苷酸序列依次为SEQ ID NO：3、5、7、9、11、13、15，所述氨基酸序列依次为SEQ ID：4、6、8、10、12、14、16；轻链可变结构域VL的核苷酸序列为SEQ ID NO：17，氨基酸序列为SEQ ID NO：18；轻链可变结构域VL依次包含高变区FRL1、CDRL1、FRL2、CDRL2、FRL3、CDRL3和FRL4，所述的核苷酸序列依次为SEQ ID NO：19、21、23、25、27、29、31所述氨基酸序列依次为SEQ ID：20、22、24、26、28、30、32。
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