[发明专利]一种对石生金钗石斛和树生金钗石斛进行色谱鉴别的方法

摘要

本方案公开了药材的鉴别技术领域中一种对石生金钗石斛和树生金钗石斛进行色谱鉴别的方法，本方案中首先制备浓度为0.01g/ml的石斛碱标准溶液；再用甲醇超声提取，超声时间为30～60min，超声功率80～100W，频率40～60kHz；离心过滤得到样品液；采用四极杆‑静电场轨道阱高分辨石斛碱标准溶液和样品液的质谱色谱。本方案采用四极杆‑静电场轨道阱高分辨质谱色谱技术为金钗石斛化学成分的分析和质量控制体系的建立，提供了一种快速有效的方法。以检出的八种特征性金钗石斛生物碱成分为指标，综合评价，建立系统的质控方法，便能够快速、灵敏、准确的对比出未知品质的金钗石斛的品质优劣。

主权项

1.一种对石生金钗石斛和树生金钗石斛进行色谱鉴别的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、浓度为0.01g/ml的石斛碱标准溶液的制备：精密称取石斛碱对照品于量瓶中，加入乙腈溶解，定容至刻度；步骤二、干燥、粉碎：将金钗石斛样品干燥后进行粉碎，粉碎后筛取过300目筛的金钗石斛细粉；步骤三、超声提取：将粉碎后的金钗石斛细粉装入锥形瓶中，向锥形瓶中注入甲醇；金钗石斛细粉与甲醇的重量比例为1：100；然后将装有金钗石斛细粉和甲醇的锥形瓶放入超声机中进行超声提取，超声时间为30～60min，超声功率80～100W，频率40～60kHz；步骤四、离心、过滤：步骤二中超声结束后金钗石斛甲醇溶液冷却至室温，使用甲醇补足超声前后质量差异，再于转速为1200～1500rpm离心10～15min；取出上清液，将上清液通过0.22μm的滤膜进行过滤，过滤液为样品液；步骤五、采用四极杆‑静电场轨道阱高分辨石斛碱标准溶液和样品液的质谱色谱：质谱条件为：HESI离子化方式；雾化温度为295～305℃，离子传输管温度为345～355℃；气体流速为30～40arb，辅助气流速为8～12arb；扫描模式为Full Scan/Targeted‑ddMS²/正离子扫描；分辨率采用MS Full Scan 70000 FWHM，MS/MS Full Scan 15000FWHM；色谱条件为：C₁₈色谱柱分离；流动相组成为0.1％甲酸水溶液‑乙腈，梯度洗脱条件为0～2min，采用浓度为5％的乙腈，2～15min，采用浓度为5％～95％的乙腈，15～17min，采用浓度为95％的乙腈；体积流量为0.3mL/min；柱温38～42℃；进样量2μL。