[发明专利]一种同时检测多种氨基糖苷类抗生素的方法

摘要

本发明属于小分子物质检测领域，具体涉及一种同时检测多种氨基糖苷类抗生素的方法。本发明利用硝酸纤维素膜固化氨基糖苷类抗生素包被原，酶标记氨基糖苷类抗生素，通过抗原‑抗体特异性结合固化在膜上，因辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物发生反应产生具有一定颜色的产物，且该产物能够长时间稳定存在这一特性，故可以在5~20分钟内直接肉眼判读检测结果；实现了对待测样本中多种氨基糖苷类抗生素的快速同时检测；相比于传统免疫分析方法，具有检测高效、成本低廉、耗时短等优点。同时，检测结果肉眼可判读，具有便捷性和实用性，其应用范围更为广泛，尤其适用于液体样本中的氨基糖苷类抗生素快速筛查。

主权项

1.一种同时检测多种氨基糖苷类抗生素的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）制备氨基糖苷类抗生素包被原；（2）分别将氨基糖苷类抗生素包被原和抗小鼠二抗点样于硝酸纤维素膜的不同点样区域内；氨基糖苷类抗生素包被原点样区域为检测区域，抗小鼠二抗点样区域为阳性对照区域，过夜包被后，用脱脂奶粉封闭；（3）将与氨基糖苷类抗生素包被原对应的酶标记氨基糖苷类抗生素单克隆抗体和待测样品混匀后滴加在包被好的硝酸纤维素膜上，使酶标记的抗体与包被原特异性结合；（4）特异性结合反应结束后加入PBST缓冲液洗涤，加入显色液，根据显色情况判断检测结果；（5）结果判定：检测区域的显色深浅与相应的氨基糖苷类抗生素含量成反比，即抗生素含量越高，显色越浅，抗生素含量越低，显色越深；若对照区域没有显色出现，则检测结果无效。