[发明专利]一种减少调节性T细胞比例的培养方法在审
| 申请号： | 201910032678.0 | 申请日： | 2019-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN109609450A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 陈必成;李杰 | 申请（专利权）人： | 温州医科大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙) 11426 | 代理人： | 范国锋;路永斌 |
| 地址： | 325000 浙江省温州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于减少调节性T细胞(Treg)比例的培养基及其培养方法，本发明使用IL‑7及IL‑15细胞因子替代传统培养基中的IL‑2，所述培养基包含150ng/ml IL‑7、250ng/ml IL‑15、0.05mM硫代甘油、0.1mM N‑乙酰‑L‑半胱氨酸。所述培养方法包括如下步骤：分离外周血单个核细胞；Anti‑CD3与anti‑CD28抗体包被细胞培养瓶；使用所述培养基对T细胞进行体外扩增；离心收集T细胞。经14天的T细胞体外扩增培养，得到与传统IL‑2细胞因子培养方法相当的T细胞总数，其中调节性T细胞的比例可控制在1％以下。本发明可在保证T细胞杀伤肿瘤靶细胞功能的前提下，有效减少调节性T细胞在体外扩增T细胞中的产生，大幅降低肿瘤的治疗中免疫抑制的不良影响。 | ||
| 搜索关键词： | 调节性T细胞 培养基 体外扩增 细胞因子 外周血单个核细胞 传统培养基 细胞培养瓶 半胱氨酸 离心收集 硫代甘油 免疫抑制 杀伤肿瘤 有效减少 靶细胞 可控制 包被 外扩 乙酰 肿瘤 替代 治疗 保证 | ||
【主权项】：
1.一种减少调节性T细胞的细胞培养方法，其特征在于，所述用于T细胞激活的培养基为KBM581无血清培养基中添加终浓度为150ng/ml IL‑7、250ng/ml IL‑15、0.05mM硫代甘油、0.1mM N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的组分，并在换半液时将培养基中各组分补加至上述终浓度，以降低体外扩增T细胞中的调节性T细胞比例。
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