[发明专利]用于检测水解酶的BRET传感器分子

摘要

本发明涉及具有结构R1‑L‑R2‑B或B‑R2‑L‑R1的生物发光共振能量转移传感器分子，其中R1是生物发光蛋白，L是连接元素，R2是非蛋白受体结构域，B是封闭基团，并且其中结合到B的R2包括水解时产生BRET的改变的可水解键。本发明还公开了一种检测水解酶的方法，该方法通过将样品与分子B‑R2接触，然后在使R2与L连接的条件下与化合物R1‑L或L‑R1接触，并检测BRET比的改变。具体地示例性传感器包括荧光素酶和二乙酸荧光素，其被酯酶水解。本发明还公开了通过去除半胱氨酸残基而衍生自Rluc8的荧光素酶。