[发明专利]一种多肉植物红蛋水泡的组织培养方法

摘要

本发明提供了一种多肉植物红蛋水泡的组织培养方法，属于景天科多肉植物组织培养方法技术领域。多肉植物红蛋水泡的组织培养方法，以红蛋水泡的叶片为外植体，依次进行愈伤组织诱导、绿色球形颗粒诱导、绿色球形颗粒的硬化与壮苗、驯化移栽等步骤，获得了大量培养苗。本发明提供的组织培养方法，提高红蛋水泡叶片的再生频率，繁殖系数高达200多倍，驯化移栽成活率高，达90％以上，与常用的叶插繁殖方法比较，可以提高红蛋水泡的繁殖效率，为红蛋水泡的大规模生产提供技术支持，同时为其他水泡多肉的研究有一定的参考价值，是一种具有明显经济和社会效益的红蛋水泡繁殖方法。

主权项

1.一种多肉植物红蛋水泡的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以红蛋水泡的叶片为外植体，消毒，得到表面消毒的外植体；2)在所述表面消毒的外植体的伤口处用羧苄青霉素粉处理，接种于愈伤组织诱导培养基中，在接种后的外植体的表面撒羧苄青霉素粉，21～25℃下愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基以MS为基本培养基，还包括以下浓度的组分：1～1.5mg/L 6‑苄基腺嘌呤、0.2～0.5mg/L吲哚乙酸、20～30g/L食用白砂糖和6.5～8g/L琼脂粉，pH值为5.8～6.0；3)将愈伤组织转接到绿色球形颗粒诱导培养基上，21～25℃下得到绿色球形颗粒诱导培养，得到绿色球形颗粒；所述绿色球形颗粒诱导培养基以MS为基本培养基，还包括以下浓度的组分：0.5～1.5mg/L玉米素、0.5mg/L IAA、20～30g/L食用白砂糖和6.5～8g/L琼脂粉，pH值为5.8～6.0；4)将所述绿色球形颗粒接种于硬化培养基上进行硬化培养，得到分化芽苗；所述硬化培养基包括花宝二号硬化培养基或1/2WPM改良培养基；所述花宝二号硬化培养基包括以下浓度的组分：0.5g/L花宝二号、0.5mg/L玉米素、0.5mg/L IAA、30g/L食用白砂糖和6.5～8g/L琼脂粉；pH值为5.8～6.0；所述1/2WPM改良培养基以不含硝酸钙的1/2WPM培养基为基础培养基，包括以下浓度的组分：0.5mg/L玉米素、0.5mg/L IAA、30g/L食用白砂糖和6.5～8g/L琼脂粉；pH值为5.8～6.0；5)将分化芽苗进行壮苗培养和驯化培养，得到红蛋水泡成苗；所述愈伤组织诱导培养、绿色球形颗粒绿色颗粒诱导培养或硬化培养期间进行光照；所述光照的时间为14～17h/d；所述光照的强度为3000～5000Lx。