[发明专利]一种高效、高清晰度的观察植物花粉管在雌蕊内生长情况的荧光显微方法

摘要

本发明公开了一种高效、高清晰度的观察植物花粉管在雌蕊内生长情况的荧光显微方法。本发明的荧光显微方法大大地弱化了雌蕊自身组织发光的现象，减少了其在较大放大倍数时对花粉管观察的干扰，从而容易取得高放大倍数下花粉管体内生长的高清晰度的影像，对细节的呈现效果非常理想。本发明的荧光显微方法将软化透明时间极大地缩短至几个小时，且染色的时间也从现有技术的数小时缩短至几分钟，使得观察实验在1天内即可完成，大幅地提高了实验效率，同时避免了使用高浓度的NaOH溶液，软化透明过程中材料大小能保持原始状态，故不会出现失水收缩的现象也无需进行复水处理。

主权项

1.一种观察植物花粉管在雌蕊内生长情况的荧光显微方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待观察植物授粉后的雌蕊作为待检材料，浸没于FAA固定液中固定4h以上；(2)将固定后的待检材料用蒸馏水清洗后，将待检材料置于容器中；向装有待检材料的容器中加入质量分数10％的无水亚硫酸钠溶液，用量以全部浸没待检材料为准，然后将容器置于90‑100℃水浴直到待检材料软化至黄色近半透明状果冻状后取出；(3)吸走容器中的无水亚硫酸钠溶液，用蒸馏水洗涤后，加入脱色苯胺蓝染液染色1‑5分钟；(4)将染色好的待检材料取出置于载玻片上，滴加甘油溶液后用盖玻片压片，在紫外光下进行荧光显微观察。