[发明专利]一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法

摘要

本发明公开了一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法，将紫茎泽兰植株叶片用乙醇回流提取得到乙醇浸膏；与硅胶混合装入层析柱，采用石油醚洗脱得到石油醚浸膏；将石油醚浸膏与硅胶混合加入到层析柱中，采用石油醚/乙酸乙酯按照不同梯度洗脱，分别得到浸膏A、B、C、D、E、F和G；浸膏B、C分别与硅胶混合加入中压制备柱中，采用正己烷/乙酸乙酯按照不同梯度洗脱，回收溶剂，分别得到杀菌活性物质B‑1、B‑2和B‑3、杀菌活性物质C‑1、C‑2和C‑3。本发明提取到的具有杀菌活性物质，能够有效防控番茄枯萎病、番茄早疫病、玉米褐斑病等植物真菌病害，使用剂量极低，实验室杀菌抑菌效果可达80％左右。

主权项

1.一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将紫茎泽兰植株叶片阴干后，粉碎为2‑5mm大小，按照料液比1:8‑1:12加入95％乙醇，80‑85℃回流提取2h，回收乙醇，得到乙醇浸膏；步骤二、按照质量比1:1‑1:2将乙醇浸膏与100‑200目硅胶混合均匀，装入层析柱，采用石油醚洗脱，然后回收石油醚，得到石油醚浸膏；步骤三、按照质量比1:1‑1:1.5将石油醚浸膏与100‑200目硅胶混合均匀拌样，然后加入到预装有200‑300目硅胶、径高比1:6‑1:10的层析柱中，采用石油醚/乙酸乙酯按照体积比100:0、100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、1:1梯度洗脱，然后回收溶剂，分别得到浸膏A、B、C、D、E、F和G；步骤四、按照质量比1:0.6‑1:0.8将上述步骤三中浸膏B与200‑300目硅胶混合均匀拌样，然后加入到预装有500‑600目硅胶、径高比1:4‑1:8的中压制备柱中，采用正己烷/乙酸乙酯按照体积比100:1、50:1、20:1和10:1梯度洗脱，洗脱速度为8‑12BV/h，回收采用正己烷/乙酸乙酯体积比为50:1、20:1和10:1进行洗脱后的溶剂，分别得到杀菌活性物质B‑1、B‑2和B‑3；按照质量比1:0.6‑1:0.8将上述步骤三中浸膏C与200‑300目硅胶混合均匀拌样，然后加入到预装有500‑600目硅胶、径高比1:8‑1:10的中压制备柱中，采用正己烷/乙酸乙酯按照体积比20:1、10:1和5:1梯度洗脱，洗脱速度为6‑8BV/h，回收溶剂，分别得到杀菌活性物质C‑1、C‑2和C‑3。